T-Cell Transfer Therapy Targeting Mutant KRAS in Cancer ad 5

Żaden z tych receptorów komórek T reaktywnych wobec G12D nie został wykryty w krwi obwodowej pacjenta tydzień przed infuzją (częstość <0,0002%). Po terapii komórkowej zaobserwowano dramatyczne różnice w wszczepianiu receptorów komórek T reaktywnych wobec KRAS G12D. Najbardziej dominujący klonotyp komórek T w infuzji (w przybliżeniu 7,3 x 1010 komórek) nie został wykryty we krwi 40 dni po terapii komórkowej, podczas gdy pozostałe klony komórek T reaktywne wobec G12D zostały wykryte w tym punkcie czasowym. Klony komórek T, które przetrwały w krwi obwodowej stanowiły 10,4%, 4,5% i 0,005% wszystkich limfocytów T krwi obwodowej w około 9 miesięcy po terapii komórkowej, a najbardziej dominujący klon limfocytów T we krwi obwodowej w tym obwodzie. czas był zmutowanym reaktywnym wobec TRBV10-02 receptorem komórek T reaktywnym względem KRAS G12D (Figura 2A i Tabela S2 w dodatkowym dodatku). Wydaje się, że nie było wzbogacenia klonów komórek T, które były reaktywne przeciwko KRAS G12D w postępującym nowotworze w stosunku do krwi obwodowej. Specyficzność i wrażliwość receptorów komórek T reaktywnych względem receptora GRAD G12D
Sklonowaliśmy cztery receptory komórek T reaktywne wobec K12S G12D i genetycznie zmodyfikowane autologiczne limfocyty T krwi obwodowej w celu ekspresji każdego z tych receptorów (ryc. S4 w dodatkowym dodatku). Trzy z czterech receptorów komórek T były preferencyjnie reaktywne wobec peptydu GRAD G12D GADGVGKSA (składającego się z 9 aminokwasów [9mer]), podczas gdy jeden receptor komórek T reagował tylko przeciwko peptydowi GRA G12G KRAS GADGVGKSAL (składającemu się z 10 aminokwasów [ 10mer]) (Figura 2B). Wszystkie receptory komórek T były specyficzne dla mutanta i nie rozpoznały peptydów KRAS typu dzikiego. W eksperymentach z miareczkowaniem peptydów stwierdziliśmy, że receptory komórek T rozpoznają peptydy w stężeniach w zakresie od nM do 10 nM, gdy są pulsowane na autologiczne PBMC (Figura 2B). Chociaż nie dysponowaliśmy żadnymi autologicznymi liniami komórek nowotworowych do wykorzystania jako cele, stwierdziliśmy, że receptory komórek T specyficznie rozpoznawały allogeniczne linie komórek raka trzustki tylko wtedy, gdy wyrażały oba zmutowane KRAS G12D i allel HLA-C * 08: 02 ( Figura 2C).
Analiza genetyczna nowotworów
Figura 3. Figura 3. Analiza częstotliwości alleli HLA-C w próbkach nowotworowych. Przedstawiono częstość występowania dwóch alleli HLA-C w reprezentatywnym przerzutowym uszkodzeniu wyciętym od Pacjenta 4095 przed terapią komórkową (Tu-1) oraz w postępująca zmiana (Tu-Pro). Szacowano, że próbki Tu-1 i Tu-Pro zawierają odpowiednio 53% i 34% guza, a zatem zawierały pewne prawidłowe komórki, które również przyczyniły się do obliczenia częstotliwości allelu HLA-C. Jak pokazano, postępująca zmiana obejmowała komórki z genetyczną utratą allelu HLA-C * 08: 02, który zapewniał bezpośredni mechanizm uchylania się przez nowotwór, ponieważ reaktywne komórki T KRAS G12D wymagają tej cząsteczki do bezpośredniego guza. uznanie. Paski I reprezentują błędy standardowe. Wartość P dla porównania częstości alleli zmian przerzutowych przed terapią i postępującej zmiany po terapii obliczono za pomocą testu pary znakowanych par pasujących Wilcoxona.
Sekwencjonowanie całego egzomu i transkryptomu ujawniło, że jedyna postępująca zmiana nadal wyrażała mutację GRAD KRAS (Tabela S3 w dodatkowym dodatku)
[hasła pokrewne: curaprox enzycal, objaw trousseau, ergometr wioślarski allegro ]

Powiązane tematy z artykułem: curaprox enzycal ergometr wioślarski allegro objaw trousseau